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索萊寶 CCK-8試劑盒細(xì)胞增殖及毒性檢測(cè)

產(chǎn)品貨號(hào):CA1210
產(chǎn)品名稱:CCK-8試劑盒(細(xì)胞增殖及毒性檢測(cè)試劑盒)
產(chǎn)品規(guī)格:100T/500T/1000T/10*500T/10*1000T
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
索萊寶 CCK-8試劑盒細(xì)胞增殖及毒性檢測(cè)

  • 產(chǎn)品型號(hào):CA1210
  • 廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
  • 更新時(shí)間:2024-11-14
  • 訪  問(wèn)  量:912
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詳細(xì)介紹
品牌SOLARBIO/索萊寶貨號(hào)CA1210
規(guī)格100T/500T/1000T/10*500T/10*1000T供貨周期現(xiàn)貨
主要用途細(xì)胞增殖及毒性檢測(cè)試劑盒

Solarbio/索萊寶  CA1210  CCK-8試劑盒(細(xì)胞增殖及毒性檢測(cè)試劑盒)

 

索萊寶  CCK-8試劑盒細(xì)胞增殖及毒性檢測(cè)

產(chǎn)品貨號(hào):CA1210

產(chǎn)品名稱:CCK-8試劑盒(細(xì)胞增殖及毒性檢測(cè)試劑盒)

產(chǎn)品規(guī)格:100T/500T/1000T/10*500T/10*1000T

產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

CCK-8試劑盒(細(xì)胞增殖及毒性檢測(cè)試劑盒)

 

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)的參數(shù)為準(zhǔn)

規(guī)格:10*1000T ; 10*500T ; 1000T ; 100T ; 500T

儲(chǔ)存條件:4℃密封避光

Cell Counting Kit-8 簡(jiǎn)稱CCK-8 試劑盒,為MTT 法的替代方法,是一種基于WST(水溶性四唑鹽,化學(xué)名:2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽)的廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性的快速高靈敏度檢測(cè)試劑盒??捎糜谒幬锖Y選、細(xì)胞增殖測(cè)定、細(xì)胞毒性測(cè)定、腫瘤藥敏等試驗(yàn)。

使用說(shuō)明:
一、制作標(biāo)準(zhǔn)曲線(測(cè)定細(xì)胞具體數(shù)量時(shí) (測(cè)定細(xì)胞具體數(shù)量時(shí))
1
、先用細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)所制備的細(xì)胞懸液中的細(xì)胞數(shù)量,然后接種細(xì)胞。
2
、按比例依次用培養(yǎng)基等比稀釋成一個(gè)細(xì)胞濃度梯度,一般要做 3-5 個(gè)細(xì)胞濃度梯度,每組 3-6 個(gè)復(fù)孔。
3
、接種后培養(yǎng)至細(xì)胞貼壁,然后加 CCK-8 試劑培養(yǎng)一定時(shí)間后測(cè)定 OD 值,制作出一條以細(xì)胞數(shù)量為橫坐標(biāo)(X 軸),OD 值為縱坐標(biāo)(Y 軸)的標(biāo)準(zhǔn)曲線。根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線可以測(cè)定出未知樣品的細(xì)胞數(shù)量(試用此標(biāo)準(zhǔn)曲線的前提是實(shí)驗(yàn)的條件要一致,便于確定細(xì)胞的接種數(shù)量以及加入 CCK-8 后的培養(yǎng)時(shí)間。)

二、細(xì)胞活性檢測(cè)

1、在 96 孔板中接種細(xì)胞懸液(100µL/孔)。將培養(yǎng)板放在培養(yǎng)箱中預(yù)培養(yǎng)(在 37℃,5% CO2 的條件下)。

2、向每孔加入 10µL CCK-8 溶液(注意不要在孔中生成氣泡,它們會(huì)影響 OD 值的讀數(shù))。

3、將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱內(nèi)孵育 1-4 小時(shí)。

4、用酶標(biāo)儀測(cè)定在 450nm 處的吸光度。

5、如果暫時(shí)不測(cè)定 OD 值,打算以后測(cè)定的話,可以向每孔中加入 10µL 0.1M HCl 或者 1%SDS(W/V)溶液,并遮蓋培養(yǎng)板避光保存在室溫條件下。在 24 小時(shí)內(nèi)吸光度不會(huì)發(fā)生變化。

三、細(xì)胞增值-毒性檢測(cè)

1、在 96 孔板中配置 100 µL 的細(xì)胞懸液。將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱預(yù)培養(yǎng) 24 小時(shí)(在 37 ℃5% CO2 的條件下)。

2、向培養(yǎng)板加入 10µL 不同濃度的待測(cè)物質(zhì)。在培養(yǎng)箱孵育一段適當(dāng)?shù)臅r(shí)間(例如:6、12、24 48 小時(shí))。

3、向每孔加入 10 µL CCK-8 溶液(注意不要在孔中生成氣泡,它們會(huì)影響 OD 值的讀數(shù))。如果待測(cè)物質(zhì)有氧化性或還原性的話,可在加 CCK-8 之前更換新鮮培養(yǎng)基(除去培養(yǎng)基,并用培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的培養(yǎng)基),去掉藥物影響。

4、將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱內(nèi)孵育 1-4 小時(shí)。

5、用酶標(biāo)儀測(cè)定在 450 nm 處的吸光度。

6、如果暫時(shí)不測(cè)定 OD 值,打算以后測(cè)定的話,可以向每孔中加入 10µL 0.1M HCl 或者 1%SDS(W/V)溶液,并遮蓋培養(yǎng)板避光保存在室溫條件下。在 24 小時(shí)內(nèi)吸光度不會(huì)發(fā)生變化。

活力計(jì)算:.

細(xì)胞活力(%)=[A(加藥)A(空白)][ A(0 加藥)A(空白)]×100

A(加藥):具有細(xì)胞、CCK-8 溶液和藥物溶液的孔的吸光度

A(空白):具有培養(yǎng)基和 CCK-8 溶液而沒(méi)有細(xì)胞的孔的吸光度

A0 加藥):具有細(xì)胞、CCK-8 溶液而沒(méi)有藥物溶液的孔的吸光度

細(xì)胞活力:細(xì)胞增殖活力或細(xì)胞毒性活力

注意事項(xiàng):

建議先做幾個(gè)孔摸索接種細(xì)胞的數(shù)量和加入 CCK-8 試劑后的培養(yǎng)時(shí)間。

白細(xì)胞可能需要培養(yǎng)較長(zhǎng)時(shí)間。

當(dāng)使用標(biāo)準(zhǔn) 96 孔板時(shí),貼壁細(xì)胞的最小接種量至少為 1 ,000 個(gè)/ (100 µL 培養(yǎng)基)。檢測(cè)白細(xì)胞時(shí)的靈敏度相對(duì)較低,因此推薦接種量不低于 2,500 個(gè)/ ( 100 µL 培養(yǎng)基)。如果要使用 24 孔板或 6 孔板實(shí)驗(yàn),請(qǐng)先計(jì)算每孔相應(yīng)的接種量,并按照每孔培養(yǎng)基總體積的 10% 加入 CCK-8 溶液。

如果沒(méi)有 450nm 的濾光片,可以使用吸光度在 430-490 nm 之間的濾光片,但是 450nm 檢測(cè)靈敏度最高。

培養(yǎng)基中酚紅的吸光度可以在計(jì)算時(shí),通過(guò)扣除空白孔中本底的吸光度而消去,因此不會(huì)對(duì)檢測(cè)造成影響。


索萊寶  CCK-8試劑盒細(xì)胞增殖及毒性檢測(cè) 

產(chǎn)品訂購(gòu)信息:

CA1210  CCK-8試劑盒(細(xì)胞增殖及毒性檢測(cè)試劑盒)  100T/500T/1000T/10*500T/10*1000T

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