AAT Bioquest  22970  Cell Meter™ 熒光線粒體超氧化物活性檢測試劑盒*針對流式細胞術(shù)進行了優(yōu)化*

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AAT Bioquest 熒光線粒體超氧化物活性檢測-常備現(xiàn)貨

美國 AAT Bioquest Inc.(前身是 ABD Bioquest，Inc.)是一家為從事生命科學研究、診斷研發(fā)及藥物開發(fā)的科學家研發(fā)、生產(chǎn)和銷售生物分析研究試劑和試劑盒的公司。公司致力于光譜學檢測領域，包括吸收（顏色），熒光和發(fā)光技術(shù)。AATBioquest 的產(chǎn)品幫助 quan shi jie 的科學家和生物醫(yī)藥研究者更好的了解生物化學，免疫學，細胞生物學和分子生物學等領域。AAT Bioquest 會不斷介紹新產(chǎn)品，快速的豐富各個領域的產(chǎn)品。

AAT Bioquest  22970  Cell Meter™ 熒光線粒體超氧化物活性檢測試劑盒*針對流式細胞術(shù)進行了優(yōu)化*  100Tests，產(chǎn)品簡介：

產(chǎn)品品牌：AAT Bioquest

產(chǎn)品貨號：22970

產(chǎn)品名稱：Cell Meter™ 熒光線粒體超氧化物活性檢測試劑盒*針對流式細胞術(shù)進行了優(yōu)化*

產(chǎn)品規(guī)格：100Tests

AAT Bioquest 熒光線粒體超氧化物活性檢測-常備現(xiàn)貨 

AAT Bioquest  22970  Cell Meter™ 熒光線粒體超氧化物活性檢測試劑盒*針對流式細胞術(shù)進行了優(yōu)化*  100Tests，產(chǎn)品說明：

線粒體是細胞超氧化物的主要生產(chǎn)者。產(chǎn)生低至中等水平的超氧化物對于正確調(diào)節(jié)許多基本細胞過程至關重要，包括基因表達、信號轉(zhuǎn)導和肌肉對耐力運動訓練的適應。不受控制的線粒體超氧化物產(chǎn)生會引發(fā)細胞氧化損傷，從而導致多種疾病的發(fā)病機制，包括癌癥、心血管疾病、神經(jīng)退行性疾病和衰老。因此，細胞內(nèi)線粒體超氧化物的檢測對于了解適當?shù)募毎趸€原調(diào)節(jié)及其失調(diào)對各種病理的影響至關重要。細胞計™熒光線粒體超氧化物活性測定試劑盒使用我們 du te 的超氧化物指示劑來量化活細胞中的超氧化物水平。MitoROS™ 580是活細胞通透性的，可以快速，選擇性地靶向線粒體中的超氧化物。當它與超氧化物反應時會產(chǎn)生紅色熒光。細胞計™熒光法細胞內(nèi)超氧化物檢測試劑盒提供靈敏的一步熒光測定，可在孵育一小時后檢測活細胞中的線粒體超氧化物。該試劑盒針對流式細胞術(shù)應用進行了優(yōu)化。

組件

組件 A：MitoROS™ 580—1瓶

組分B：檢測緩沖液—1 瓶 （10 mL）

組件C：DMSO—1 瓶 （100 μL）

1.    制備密度為 0.5 - 1 × 10 的細胞6細胞/毫升

2.    用測試化合物處理細胞以誘導超氧化物

3.    將 1 μL 500X MitoROS™ 580 加入 0.5 mL 細胞懸液中

4.    將細胞在 37°C 下染色 1 小時

5.    使用帶FL2通道的流式細胞儀監(jiān)測熒光強度

重要說明：在開始實驗之前，請在室溫下解凍所有組分。

儲備液的制備

除非另有說明，否則所有未使用的儲備溶液應分成一次性等分試樣，并在制備后儲存在-20°C。避免反復凍融循環(huán)。

1. MitoROS 580儲備溶液（500X）：

將100μLDMSO（組分C）加入MitoROS 580（組分A）的小瓶中，混合均勻，制成500X MitoROS™™™ 580儲備溶液。避光。注意：儲存時，請密封管子。

實驗方案樣本

1.    對于每個樣品，在您選擇的 0.5 mL 生長培養(yǎng)基或緩沖液中制備細胞，密度為 5×10⁵至 1×10⁶細胞/毫升。注意：應單獨評估每個細胞系，以確定超氧化物誘導的最佳細胞密度。

2.    在檢測緩沖液（組分 B）或所需緩沖液（如 PBS）中用 25 μL 20X 測試化合物處理細胞以誘導超氧化物。對于對照細胞（未處理的細胞），加入相應量的復合緩沖液。

3.    將細胞在37°C下孵育至少30分鐘或所需的時間，避光。注意：用50μM 抗 霉 su A（AMA）在37°C下處理Jurkat細胞30分鐘以誘導超氧化物。有關詳細信息，請參見圖 1?；摶ㄇ嗨兀?span>50μM）或H₂O₂（1 mM） 也可用于誘導超氧化物。

4.    將 1 μL 500X MitoROS™ 580 儲備溶液加入 0.5 mL 細胞懸液中。

5.    在 37°C 下孵育 1 小時。注意：對于貼壁細胞，用0.5 mM EDTA輕輕提起細胞以保持細胞完整，并在用MitoROS™ 580孵育之前用含血清的培養(yǎng)基洗滌細胞一次。適當?shù)姆跤龝r間取決于所使用的單個細胞類型和測試化合物。優(yōu)化每個實驗的孵育時間。

6.    使用具有FL2通道的流式細胞儀（Ex / Em = 488 / 590 nm）監(jiān)測熒光強度。對感興趣的細胞進行門控，不包括碎片。

產(chǎn)品訂購信息：

22970  Cell Meter™ 熒光線粒體超氧化物活性檢測試劑盒*針對流式細胞術(shù)進行了優(yōu)化*  100Tests