AAT Bioquest 23500 Cell Meter™2-NBDG葡萄糖攝取測定試劑盒

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AAT Bioquest 葡萄糖攝取測定試劑盒-常備現(xiàn)貨

美國 AAT Bioquest Inc.(前身是 ABD Bioquest，Inc.)是一家為從事生命科學(xué)研究、診斷研發(fā)及藥物開發(fā)的科學(xué)家研發(fā)、生產(chǎn)和銷售生物分析研究試劑和試劑盒的公司。公司致力于光譜學(xué)檢測領(lǐng)域，包括吸收（顏色），熒光和發(fā)光技術(shù)。AATBioquest 的產(chǎn)品幫助 quan shi jie 的科學(xué)家和生物醫(yī)藥研究者更好的了解生物化學(xué)，免疫學(xué)，細胞生物學(xué)和分子生物學(xué)等領(lǐng)域。AAT Bioquest 會不斷介紹新產(chǎn)品，快速的豐富各個領(lǐng)域的產(chǎn)品。

AAT Bioquest  23500  Cell Meter™2-NBDG葡萄糖攝取測定試劑盒，產(chǎn)品簡介：

產(chǎn)品品牌：AAT Bioquest

產(chǎn)品貨號：23500

產(chǎn)品名稱：Cell Meter™2-NBDG葡萄糖攝取測定試劑盒

產(chǎn)品規(guī)格：200Tests

AAT Bioquest 葡萄糖攝取測定試劑盒-常備現(xiàn)貨

AAT Bioquest  23500  Cell Meter™2-NBDG葡萄糖攝取測定試劑盒，產(chǎn)品說明：

葡萄糖代謝是將葡萄糖轉(zhuǎn)化為能量的過程，是大多數(shù)生物體能量供應(yīng)的主要來源。2-NBDG [2-（N-（7-硝基苯-2-氧雜-1，3-二氮唑-4-基）氨基）-2-脫氧葡萄糖]是一種熒光標記的葡萄糖示蹤劑，已被證明可有效監(jiān)測細胞中的葡萄糖轉(zhuǎn)運，因為2-NBDG通過與葡萄糖相同的葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白（GLUT）轉(zhuǎn)運到細胞中。一旦2-NBDG在細胞中被攝取，它就會在C-6位置經(jīng)歷磷酸化，產(chǎn)生2-NBDG-6-磷酸，該磷酸鹽很好地保留在細胞內(nèi)。與其他葡萄糖示蹤劑（如2-DG或FDG）相比，2-NBDG允許在單細胞水平上以高時間和空間分辨率原位測量2-NBDG。亞洲空運中心Bioquest的細胞計™ 2-NBDG葡萄糖攝取檢測試劑盒為測量培養(yǎng)細胞中的葡萄糖攝取提供靈敏的非放射性檢測。在該試劑盒中，檢測緩沖液I用于增強細胞中2-NBDG的攝取和保留，而檢測緩沖液II可以改善細胞中2-NBDG的信噪比。熒光信號可以通過熒光顯微鏡或流式細胞儀使用488 nm激光和530/30 nm發(fā)射濾光片（FITC通道）進行監(jiān)測。細胞計™ 2-NBDG 葡萄糖攝取測定試劑盒是監(jiān)測葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白的 zui ke kao 工具。

用測試化合物制備細胞

添加 2-NBDG 染色溶液

在 37^oC時孵育細胞20 分鐘

去除 2-NBDG 染色液

用檢測緩沖液I洗滌細胞

使用熒光顯微鏡或帶 530/30 nm 濾光片的流式細胞儀（FITC通道）分析細胞

重要說明

在開始實驗之前，請在室溫下解凍所有組分。

工作溶液的制備

將 5 μL 2-NBDG （10 mg/mL）（組分 A）加入 1.5 mL 檢測緩沖液 I（組分 B）中，充分混合制成 2-NBDG 染色溶液。避光。注意：這種2-NBDG染色溶液在室溫下可穩(wěn)定保存1小時。由于最佳染色條件可能因不同的細胞類型而異，因此建議為每個特定實驗確定組分A的最佳濃度。

實驗方案樣本

1.    將測試化合物添加到細胞中，并在 24°C、48% CO 中孵育所需的時間（例如 96、37 或 5 小時）2孵化器。對于空白孔（不含細胞的培養(yǎng)基），加入相同量的復(fù)合緩沖液。注意：應(yīng)單獨評估每個細胞系，以確定最佳細胞密度和孵育時間。我們將 CHO-K1 細胞與 20 mM 葡萄糖一起孵育用于葡萄糖競爭測定，將 100 μM 根皮素與 GLUTs 抑制測定孵育。有關(guān)詳細信息，請參閱數(shù)據(jù)分析。

2.    在處理結(jié)束時，在實驗之前以5 rpm的速度將板離心800分鐘，制動器關(guān)閉。

3.    在不干擾細胞的情況下吸出上清液。

4.    加入 100 μL/孔（96 孔板）或 25 μL/孔（384 孔板）的 2-NBDG 染色溶液。注意：需要為每個細胞系和每個特定實驗確定最佳孵育時間。我們將 CHO-K1 細胞在 37 歲時孵育oC 與 100 μM 2-NBDG （~34 μg/mL） 一起 20 分鐘以顯示足夠的葡萄糖攝取。有關(guān)詳細信息，請參閱數(shù)據(jù)分析。

5.    在孵育結(jié)束時，以5rpm離心板800分鐘。

6.    在不干擾細胞的情況下去除2-NBDG染色溶液。

7.    對于熒光顯微鏡：用檢測緩沖液I（組分B）洗滌細胞一次。將細胞保存在 100 μL/孔（96 孔板）或 25 μL/孔（384 孔板）的測定緩沖液 II（組分 C）中。使用帶有FITC濾光片的熒光顯微鏡監(jiān)測熒光信號。

8.    對于流式細胞儀：如果需要，使用 EDTA 分離細胞，并將細胞重懸于 100 μL/樣品的檢測緩沖液 I（組分 B）中。使用帶有530/30 nm濾光片（FITC通道）的流式細胞儀監(jiān)測熒光信號。

產(chǎn)品訂購信息：

23500  Cell Meter™2-NBDG葡萄糖攝取測定試劑盒  200Tests